Giới thiệu về Xét nghiệm bất hoạt Adenovirus ở chó

Cơ sở nào tính phí hợp lý hơn cho xét nghiệm bất hoạt virus loại CAVⅡ? Feifan Testing là một tổ chức thử nghiệm của bên thứ ba có uy tín cao và là một công ty được công nhận trên toàn quốc. Sau nhiều năm phát triển, công ty đã hợp tác với hàng nghìn công ty. Đồng thời, công ty đã thiết lập quan hệ hợp tác lâu dài với nhiều viện nghiên cứu khoa học và trường đại học để cung cấp báo cáo dữ liệu chính xác cho nhiều khách hàng hơn.

Tính sinh miễn dịch của virus CAV loại Ⅱ tái tổ hợp có chứa carbohydrate/nucleoprotein của virus dại và các protein cấu trúc khác

1. Adenovirus tái tổ hợp loại 2 ở chó biểu hiện đường/lõi virus dại và các protein cấu trúc khác được chuẩn bị với số lượng lớn trên tế bào MDCK và TCIDso đã được xác định. Chó nhà không có tiền sử tiêm chủng được sử dụng làm động vật thử nghiệm. Mỗi con chó được tiêm bắp 0,2 ml virus tái tổ hợp có TCID là 10°. Đồng thời, những con chó được tiêm chủng bằng chủng vắc-xin adenovirus loại 2 ở chó được dùng làm nhóm đối chứng.

2. Bắt đầu từ một tuần sau khi tiêm chủng, huyết thanh từ những con chó đã được tiêm chủng và những con chó đối chứng được thu thập và tách riêng sau mỗi hai tuần.

3. Sử dụng phương pháp ELISA gián tiếp, nghĩa là dùng virus dại tinh khiết làm kháng nguyên phủ lên đĩa ELISA, huyết thanh miễn dịch của chó cần thử nghiệm phản ứng với kháng nguyên này, sau đó kết hợp với kháng thể thứ cấp kháng chó gắn nhãn peroxidase cải ngựa và nhuộm màu. Kết quả cho thấy kháng thể đặc hiệu với virus dại (đường/nhân và các protein cấu trúc khác) tăng lên đáng kể sau khi tiêm chủng bằng virus tái tổ hợp.

4. Máu chống đông được thu thập từ chó 4 tuần sau khi tiêm vắc-xin tái tổ hợp protein hạt nhân và chia thành 2 ống × 0,1 ml. Thêm đệm ly giải hồng cầu và ly tâm các ống sau khi ủ. Kết tủa được treo trong 0,2 ml PBS. Huyết thanh kháng CD4+ và CD8+ của cừu được gắn nhãn FITC được ủ với các tế bào bạch cầu được treo trong PBS ở 4°C trong 1 giờ. Máu được rửa bằng PBS 2 lần và sau đó được treo để phát hiện FACS. Kết quả cho thấy số lượng tế bào CD4+ ở chó được tiêm vắc-xin cao hơn đáng kể so với nhóm đối chứng và tỷ lệ CD4+/CD8+ tăng lên đáng kể. Điều này chỉ ra rằng protein hạt nhân trong vắc-xin tái tổ hợp tạo ra mức độ miễn dịch tế bào cao hơn.

Xét nghiệm trung hòa và bảo vệ miễn dịch của kháng thể do virus CAVⅡ tái tổ hợp chứa đường/nhân virus dại và các protein cấu trúc khác gây ra

Lấy 100 ul huyết thanh chó từ nhóm đối chứng và nhóm đã được tiêm chủng trong thí nghiệm trước, trộn chúng với 35 LDa độc tố tế bào CVS gây bệnh dại, ủ ở nhiệt độ phòng trong 3 giờ và tiêm dưới da 10 ul vào chân sau của 40 con chuột đang bú BALB/c. Theo dõi trong 4 tuần. Kết quả cho thấy CVS được ủ chung với huyết thanh chó nhóm đối chứng khiến cả 40 con chuột bú mẹ đều bị bệnh và chết, trong khi không có con chuột nào bị bệnh hoặc tử vong ở nhóm được ủ chung với huyết thanh chó được tiêm chủng bằng virus tái tổ hợp. Điều này chỉ ra rằng các kháng thể chống lại các protein cấu trúc như đường/lõi do CAV-2 tái tổ hợp tạo ra có tác dụng trung hòa đáng kể.

Từ các kết quả trên, có thể kết luận rằng tác dụng tích cực của phát minh hiện tại là virus tái tổ hợp thu được bằng cách chuyển chuỗi DNA toàn bộ bộ gen tái tổ hợp mang đường/lõi virus dại và các băng biểu hiện protein cấu trúc khác vào các tế bào nhạy cảm với vùng E3 loại 2 của adenovirus ở chó (tức là dòng tế bào MDCK). Nó không đòi hỏi nhiều công đoạn phân lập, định danh và tinh chế virus phức tạp. Đồng thời, ngoài đặc điểm sinh học và miễn dịch của adenovirus chó type 2, vắc-xin tái tổ hợp này còn thể hiện đặc tính miễn dịch của glycoprotein hoặc nucleoprotein của virus dại, tức là ngoài việc kích thích cơ thể sản sinh miễn dịch chống lại adenovirus chó, còn có thể sản sinh miễn dịch chống lại virus dại, do đó đạt được sự biểu hiện liên tục và ổn định của gen ngoại sinh.

Quy trình báo cáo kiểm tra chất lượng thử nghiệm Feifan:

1. Cung cấp thông tin sản phẩm

2. Các kỹ sư đề xuất các hạng mục thử nghiệm phù hợp dựa trên thông tin sản phẩm của bạn và cung cấp cho bạn báo giá

3. Xác nhận không có vấn đề gì với báo giá, sau đó gửi mẫu đến phòng thí nghiệm của chúng tôi

4. Nộp lệ phí thi và sắp xếp ngày thi

5. Sau khi thử nghiệm hoàn tất, báo cáo thử nghiệm sẽ được phát hành và gửi đến khách hàng